在每根光纤的顶部蚀刻出一个小洞,可镶嵌直径为3um的微磁珠。每个微磁珠上可以根据不同的需求连接不同的配体,如寡核苷酸、蛋白质、抗体等。制作芯片时,将带有所需配体的不同微磁珠混合后与光纤束进行自组装,蛋白固定处理,通过微珠上寡核苷酸标签序列(address) 确认每根光线上所吸附的不同的微珠。现有微珠芯片上每束光纤可镶嵌1536种微珠,因此,每种微珠在一束光纤中有30次重复。结合在微珠上的寡核苷酸或者蛋白可与荧光标记的配对---或配体发生相互作用,发生的信号被激发后通过光纤传递到检测器。
新兴的微阵列芯片技术是分子生物学技术和计算机技术高度有机结合的产物,体积小、实验效能高 , 可以节约人力、 物力和时间, 是对传统分子生物学研究方法和---检测方法的重要补充 。在微阵列技术的实际应应用中 ,什么是蛋白固定,数据分析具有举足轻重的作用 , 目前还没有对现有的各种统计学模型进行过综合评价 。这一缺陷亟待弥补 。虽然人类基因组草图已经绘制完成 , 但整个基因组研究才---开始 。此时如果没有把研究所产生的---数据进行有效的管理 , 将对后续研究的深入和应用造成---的影响 。从现有资料来看, 应用微阵列芯片技术所产生的数据还没有统一的管理方案,海南蛋白固定, 这些研究的结果仍然分散地保存在不同的数据 库中,蛋白固定修饰,这些数据库也处在探索阶段 。
2.---基因心片
---基因芯片通常涉及基因组规模与数量(一般大于10000个基因),分别采用接触式点样、非接触式点样或者半导体技术制备样品。接触式点样方法包括点样元件或点样元件中的液体和芯片基片间有直接接触的各种方法。非接触式芯片制备方法包括各种芯片制备中不需点样元件和芯片基片间直接接触的各种技术,其样头的是以可控的方式从喷嘴中喷出小体积的液滴。半导体制备技术指借鉴计算机芯片制造业中的微型化加工方法的基因芯片制备技术。基因芯片的工作流程如下:
(1) 经---pcr扩增获得独立cdnva插入片段。
(2)用机械手将 pcr产物点在玻璃板上,变性、固定。
(3)分 别---同或组织中分离mrna.反转录生成cdna.
(4)用 不同的荧光染料标记不同或组织的cdna。
(5)将标记好的 cdna与点好的芯片进行杂交。
(6)激光扫描芯片杂交结果, 计算机处理。
(7)分 析杂交数据。
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