2.apes(3-氨----乙---)
apes必须现用现配。用此方法黏合的玻片应垂直烤片而不能水平烤片,否则,抗体固定化,组织片中易出现气泡。 apes的使用方法:用50倍稀释(apesl份、49份混合),将洗净的玻片放人稀释好的apes中,停留20~30秒,取出稍停,再人纯或蒸馏水中涮去未结合的apes。置通风橱中晾干即可。注意用apes---片处理的载玻片捞片时组织应---.并尽量减少气泡存在,以免影响染色结果。注意不要将apes与其他---混合使用。
在每根光纤的顶部蚀刻出一个小洞,可镶嵌直径为3um的微磁珠。每个微磁珠上可以根据不同的需求连接不同的配体,抗体固定后失活,如寡核苷酸、蛋白质、抗体等。制作芯片时,将带有所需配体的不同微磁珠混合后与光纤束进行自组装,通过微珠上寡核苷酸标签序列(address) 确认每根光线上所吸附的不同的微珠。现有微珠芯片上每束光纤可镶嵌1536种微珠,广西抗体固定,因此,每种微珠在一束光纤中有30次重复。结合在微珠上的寡核苷酸或者蛋白可与荧光标记的配对---或配体发生相互作用,发生的信号被激发后通过光纤传递到检测器。
目前,由于灵敏度所限,多数方法需要在标记和分析前对样品进行适当程序的扩增,抗体固定化技术,不过也有不少人试图绕过这一问题,如 mosaic technologies 公司引入的固相 pcr 方法,引物特---强,无交叉污染并且省去了液相处理的烦琐; lynx therapeutics 公司引入的---并行固相法 (massively parallel solid-phase cloning) ,可在一个样品中同时对数以万计的 dna 片段进行,且无需单独处理和分离每个。
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