以合成寡核苷酸探针为例,该技术主要步骤为:首先使支持物---化,什么是aminosilane,并用光敏保护基团将其保护起来。每次选取择适当的蔽光膜( mask )使需要聚合的部位透光,其它部们不透光。这样,光通过蔽光膜照射到支持物上,受光部位的---解保护。因为合成所用的单体分子一端按传统固相合成方法活化,另一端受光敏保护基的保护,所以发生偶联的部位反应后仍旧带有光敏保护基团。因此,每次通过控制蔽光膜的图案(透光与不透光)决定哪些区域应被活化,以及所用单体的种类和反应次序就可以实现在待定位点合成大量预定序列寡聚体的目的。
1. 数据---分析
因为用基因芯片进行杂交分析,每次实验结果都会有些变化,因为包括靶dna浓度、探针浓度、杂交双方的序列组成、盐浓度以及温度等许多因素影响了杂合双链的形成和稳定性。因此,需要进行重复试验以---数据的准确。主要的方法是通过两次平行杂交反应,aminosilane产家,将每个基因在两个反应中的表达水平做成对应散点图,只要绝大多数基因的杂交结果都在45度斜线附近,aminosilane,就说明实验结果是可的。
2.生物学意义分析
主要指通过分析芯片杂交数据,aminosilane产品,研究差异表达基因的生物学意义。通常,在芯片中某一或发育时期可能有成千上万个差异表达基因。例如,基因芯片分析植物根部可能有400多个特意表达的基因,如果要将这些基因的来龙去脉都搞清楚,可能要追溯超过4000篇以上的文献(假设1个基因需要查阅10篇文献)。这种不捡重点的方法耗时耗力,所获得的结果也往往没有意义。
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