物理吸附是简单的抗体固定化方法,---片,包括静电作用、疏水作用、极性相互作用等非共价键作用。优点显而易见—省时省力省钱,---片成分,缺点也是不可避免—(1)抗体偶联的取向(orientation)不可控,完全由概率来确定;(2)物理吸附作用力弱,应用时有抗体脱离现象。学中,海南---片,经常用到物理吸附的地方就是一抗的负载过程。比如在elisa板(聚)和侧流试纸条(纤维素膜)等表面负载抗体的时候,用到的就是物理吸附作用。
感受完这种粗糙度之后,2010年就有人把疏水蛋白引入到检测中,---这种基质表面抗体堆积不均匀的情况。疏水蛋白能够自组装形成10nm厚的两亲性膜,疏水性一侧贴在疏水性的聚板上,亲水性的一侧伸向溶液中,可以物理吸附抗体,用于组装一抗。石英晶体微天平结果显示在ph=5时,聚板上形成一层致密的膜;x射线光电子能谱和水接触角测试显示疏水蛋白修饰后,---片 涂层,疏水的聚板能够保持长达3个月的亲水性;原子力显微镜结果显示,连接到疏水蛋白上的抗体也终于站起来了,是一种“end-on”的取向排列。
共价偶联比物理吸附更---一些,主要表现在它克服了物理吸附的两个缺点:共价偶联在固体表面的抗体(1)排列取向一定程度上是确定的;(2)不容易脱离到溶液中。赖氨酸、谷氨酸和天冬氨酸等---酸经常被作为蛋白质修饰的靶点,其中赖氨酸尤甚(chem. sci., 2017,8, 63-77,chem. sci., 2018, 9, 79–87),其它---酸由于位于蛋白质内部或反应性弱或不可控等原因而很少用于偶联。
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