使用广泛的---和羧基偶联剂就要数edc和nhs(sulfo-nhs)了。大多数情况下,微阵列基片的处理,同时使用edc/nhs的交联于只使用edc的,nhs的使用能够---增强偶联效率。但也有个例,微阵列基片的价格,比如2012年的一篇工作(diagnostics (basel). 2012 aug 27;2(3):23-33.),微阵列基片,他们在apets修饰的金芯片和96孔板表面组装一抗,发现单独使用edc比同时使用edc/nhs和edc/sulfo-nhs都。
在基片上制备微阵列(即高密度地固定生物分子于基片上)的过程是微阵列芯片的关键技术,发展非常迅速,相继出现了原位合成、预合成后钢针按触式点样、预合成后毛细管接触式点样、预合成后微泵喷涂等微阵列制备方法。这些方法在提高点样和点样效率、降低芯片成本等方面各有长有短。国际上一些大公司和研究机构,如biorobotics公司、cartesian公司、telechem interna-tional inc. standford大学和生物芯片北京工程研究中心等,都在进行微阵列芯片的制备方法及制备系统的研发。 biorobotics 公司开发的芯片制备系统和telechem international inc 的微阵列制备工作头为各研究机构所普遍采用。
物理吸附作用是简单粗糙的,下面用一个例子定性地感受一下。有研究者在2005年使用原子力显微镜和中子反射研究了一种抗体(小鼠抗人绒毛膜单抗体)在亲水性二氧化硅和水界面处的取向排列方式,结果显示:抗体主要以“平躺”的方式排列在界面处,微阵列基片厂家,即抗体的fc和fab端均与二氧化硅表面接触。在一些地方会形成2-15个抗体分子大小的不均匀团簇,不添加水的对比实验显示抗体在二氧化硅表面会形成的团簇。结果表明抗体与亲水表面的作用力很弱,相邻蛋白质之间的疏水引力是导致团簇形成的原因。
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