以合成寡核苷酸探针为例,该技术主要步骤为:首先使支持物---化,并用光敏保护基团将其保护起来。每次选取择适当的蔽光膜( mask )使需要聚合的部位透光,其它部们不透光。这样,光通过蔽光膜照射到支持物上,受光部位的---解保护。因为合成所用的单体分子一端按传统固相合成方法活化,另一端受光敏保护基的保护,所以发生偶联的部位反应后仍旧带有光敏保护基团。因此,基因芯片价格,每次通过控制蔽光膜的图案(透光与不透光)决定哪些区域应被活化,以及所用单体的种类和反应次序就可以实现在待定位点合成大量预定序列寡聚体的目的。
目前,什么是基因芯片,由于灵敏度所限,多数方法需要在标记和分析前对样品进行适当程序的扩增,不过也有不少人试图绕过这一问题,广东基因芯片,如 mosaic technologies 公司引入的固相 pcr 方法,引物特---强,无交叉污染并且省去了液相处理的烦琐; lynx therapeutics 公司引入的---并行固相法 (massively parallel solid-phase cloning) ,可在一个样品中同时对数以万计的 dna 片段进行,基因芯片报告,且无需单独处理和分离每个。
2.apes(3-氨----乙---)
apes必须现用现配。用此方法黏合的玻片应垂直烤片而不能水平烤片,否则,组织片中易出现气泡。 apes的使用方法:用50倍稀释(apesl份、49份混合),将洗净的玻片放人稀释好的apes中,停留20~30秒,取出稍停,再人纯或蒸馏水中涮去未结合的apes。置通风橱中晾干即可。注意用apes---片处理的载玻片捞片时组织应---.并尽量减少气泡存在,以免影响染色结果。注意不要将apes与其他---混合使用。
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