2.---基因心片
---基因芯片通常涉及基因组规模与数量(一般大于10000个基因),分别采用接触式点样、非接触式点样或者半导体技术制备样品。接触式点样方法包括点样元件或点样元件中的液体和芯片基片间有直接接触的各种方法。非接触式芯片制备方法包括各种芯片制备中不需点样元件和芯片基片间直接接触的各种技术,其样头的是以可控的方式从喷嘴中喷出小体积的液滴。半导体制备技术指借鉴计算机芯片制造业中的微型化加工方法的基因芯片制备技术。基因芯片的工作流程如下:
(1) 经---pcr扩增获得独立cdnva插入片段。
(2)用机械手将 pcr产物点在玻璃板上,变性、固定。
(3)分 别---同或组织中分离mrna.反转录生成cdna.
(4)用 不同的荧光染料标记不同或组织的cdna。
(5)将标记好的 cdna与点好的芯片进行杂交。
(6)激光扫描芯片杂交结果, 计算机处理。
(7)分 析杂交数据。
基因芯片(又称 dna 芯片、生物芯片)技术就是顺应这一科学发展要求的产物,它的出现为解决此类问题提供了光辉的前景。该技术系指将大量(通常每平方厘米点阵密度高于 400 )探针分子固定于支持物上后与标记的样品分子进行杂交,通过检测每个探针分子的杂交信号强度进而获取样品分子的数量和序列信息。通俗地说,就是通过微加工技术 ,表面---化的意义,将数以万计、乃至百万计的特定序列的dn---段(基因探针),有规律地排列固定于2cm2 的硅片、玻片 等支持物上,构成的一个二维dna探针阵列,表面---化的目的,与计算机的电子芯片十分相似,所以被称为基因芯片。基因芯片主要用于---工作 。
与其他芯片制作技术相比较,表面---化,微珠芯片具有如下优势:
(1) 密度高微珠芯片的点样密度是原位光合成法的16倍,喷点法的100倍,接触式点样的400倍。
(2)测试重复性好鉴 于密度的特点,微珠芯片中每个样品都能---约30个重复,表面---化原理,从而---测试的高重复性、高重复串以及高---性。
(3)定制方便若需要在已完成的芯片中增加测试点或新基因,只要合成相应的微珠加入到微珠混合池中即可。
(四)基因芯片数据分析
基因芯片分析包括五个基本步骤:生物学问题、样品制备、生物化学反应、检测、数据模型分析。基因芯片数据分析包括两部分,数据---性分析和生物学意义分析。
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