蛋白固定-贝蒂克生物-蛋白固定的方法

微阵列芯片应用流程

1）制备靶点

从生物标本中提取核苷酸并进行标记；

（2）杂交

让靶点与芯片上的cdna或寡核苷酸序列进行孵育；

（3）获取数据

扫描与探针杂交的靶点表现出来的信号强度

（4）数据分析

从大量数据中得出具有生物学意义的结论

微阵列芯片技术通过测定能够与探针杂交的mrna的数量，反映表达此mrna的基因的转录情况，芯片的构建首先要根据研究的需要选择基因及相应的探针，其次是从标本中提取mrna，蛋白固定，并制备出靶点，然后将靶点加入芯片，进行孵育杂交、冲洗掉没有杂交的样品以及扫描等操作，得到原始数据，再将这些数据进行标准化和统计分析后得到结论，构造适当的微阵列芯片是开展后续研究的基础。

物理吸附作用是简单粗糙的，蛋白固定提取，下面用一个例子定性地感受一下。有研究者在2005年使用原子力显微镜和中子反射研究了一种抗体（小鼠抗人绒毛膜单抗体）在亲水性二氧化硅和水界面处的取向排列方式，结果显示：抗体主要以“平躺”的方式排列在界面处，即抗体的fc和fab端均与二氧化硅表面接触。在一些地方会形成2-15个抗体分子大小的不均匀团簇，不添加水的对比实验显示抗体在二氧化硅表面会形成的团簇。结果表明抗体与亲水表面的作用力很弱，相邻蛋白质之间的疏水引力是导致团簇形成的原因。