以合成寡核苷酸探针为例,表面---化,该技术主要步骤为:首先使支持物---化,并用光敏保护基团将其保护起来。每次选取择适当的蔽光膜( mask )使需要聚合的部位透光,其它部们不透光。这样,光通过蔽光膜照射到支持物上,受光部位的---解保护。因为合成所用的单体分子一端按传统固相合成方法活化,另一端受光敏保护基的保护,所以发生偶联的部位反应后仍旧带有光敏保护基团。因此,每次通过控制蔽光膜的图案(透光与不透光)决定哪些区域应被活化,表面---化原理,以及所用单体的种类和反应次序就可以实现在待定位点合成大量预定序列寡聚体的目的。
微阵列(microarray)芯片以高密度阵列为特征。其基础研究始于20世纪80年代末,本质上是一种生物技术,主要是在生物遗传学领域发展起来的。
微阵列分为cdna微阵列和寡聚核苷酸微阵列.微阵列上印有大量已知部分序列的dna探针,微阵列技术就是利用分子杂交原理,材料表面---化,使同时被比较的标本(用同位素或荧光素标记)与微阵列杂交,通过检测杂交信号强度及数据处理,把他们转化成不同标本中特异基因的丰度,从而比较不同标本的基因表达水平的差异.微阵列技术是一种探索基因组功能的有力手段.
cdna基因百度---由pcr物质构成,为发夹结构构造,长短一般在百余至千余碱基对,因此芯片的混种杂交标准对每一个基因无法---是好的,假阳性率比较高,因而,硅片表面---化,判断cdna微阵列的后的结果时,必须对挑选出的基因开展测序。在应用cdna微阵列开展研究时,一般需要提供一个对比样版,把与必须研究的样本给与不同类型的标识,将二者灯亮混匀一同引入芯片开展孵育。扫描仪后所得到的原始记录是每个表格中中网络信号的比例。
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