2、贴壁细胞如何分离下来?
如果把贴壁的细胞洗下来常用的办法就是加入胰蛋白酶---,37°c环境下放置3~5min便可,但是残留培养瓶内的胰蛋白酶对细胞有毒性作用,所以都会添加低浓度的以中和胰蛋白酶的。用超声的办法也可以把细胞分离下来,但是要注意超声的频率不能太大,而且细胞很娇嫩,超声会导致细胞的。这是由细胞的性质特点决定的。
细胞贴壁(cell adhesion)是指贴壁依赖性细胞在培养表面上贴附和铺展的过程。细胞能否在培养表面上贴附,一是决定于细胞本身的特性,二是决定于细胞与培养表面接触概率,三是决定于细胞与培养表面的相容性,这又与表面的化学物理性质有关。细胞贴壁速率也与培养表面的化学物理性质有关,tc处理细胞,---是培养表面上的电荷密度影响较大。中的冷析蛋白和纤维粘连蛋白可在培养表面与细胞间架桥,非tc处理,有利于加快细胞贴附速率。细胞在培养表面上的铺展除了与以上因素有关外,广东tc处理,还与表面情况---是光滑度有关
培养细胞在木贴附于底物之---般均似球体样;当与底物贴附后,细胞将逐渐伸展而形成一定的形 态,呈成纤维细胞样或上皮细胞样等。细胞附着于底物时并非一-种需要能量的过程,一般认为与电荷有关。据资料记载,37°c时在2min内细胞之间即可形成键,该键可对0. 01%胰蛋白酶起作用且仅发生于细胞之间,而细胞与底物之间则无; 8 min后才有稳定的键形成。
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